RPGR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404441
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RPGR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RPGR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RPGR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404441 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RPGR (regulador da GTPase da retinite pigmentosa) codifica uma proteína ciliar enriquecida no cílio conector dos fotorreceptores, onde dá suporte ao transporte intraflagelar e ao tráfego de cargas associadas à membrana necessárias para a manutenção do segmento externo. A RPGR interage com complexos associados aos cílios e contribui para processos de transporte dependentes de microtúbulos que preservam a estrutura do cílio e a competência de sinalização. A disrupção de RPGR compromete a função ciliar e a homeostase dos fotorreceptores, relacionando sua perda de função a fenótipos hereditários de degeneração retiniana, como a retinite pigmentosa ligada ao X. Na pesquisa biomédica, RPGR é comumente estudado no contexto de mecanismos de ciliopatias, biologia de células fotorreceptoras e relações genótipo–fenótipo em doenças da retina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RPGR (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RPGR em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RPGR, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RPGR na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RPGR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RPGR para a investigação da sinalização de RPGR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RPGR críticos para a função RPGR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RPGR para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RPGR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RPGR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RPGR. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RPGR Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RPGR (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RPGR para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RPGR definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.