RNPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422692

概要

マウス Rnps1 は、保存性の高いRNA結合タンパク質であるRNPS1をコードしており、pre-mRNAスプライシングおよびスプライシング後のmRNP監視に機能します。RNPS1はエクソン接合部複合体（EJC）関連のプロセスに関与し、ナンセンス変異依存mRNA分解（NMD）を支援することで、転写産物の品質管理、mRNAの核外輸送、翻訳適格性に影響を与えます。これらの作用を通じて、RNPS1はプロテオームの完全性維持に寄与し、細胞周期の進行やストレス応答に関連する遺伝子発現プログラムを制御します。スプライシングおよびmRNA監視経路の破綻は、神経発達表現型やがんに関連したトランスクリプトーム再構築に広く関与するとされており、RNPS1はRNAプロセシングの機構研究における有用な結節点となります。

RNPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRnps1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Rnps1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Rnps1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RNPS1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RNPS1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Rnps1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RNPS1の機能に不可欠なRnps1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Rnps1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RNPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRNPS1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Rnps1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RNPS1 HDRプラスミド（m）および RNPS1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRnps1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRnps1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。