RNF25 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408040-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF25O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF25 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNF25 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF25. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RNF25 Anticorpo (E-10): sc-398749
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF25 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408040-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RNF25 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408040-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF25 codifica uma ligase E3 de ubiquitina que contém um domínio RING finger e ajuda a regular a estabilidade proteica e a sinalização ao catalisar a transferência de ubiquitina para substratos específicos. Por meio do controlo dependente de ubiquitina da renovação/degradação de proteínas e da composição de complexos de sinalização, a RNF25 pode influenciar vias associadas a respostas imunitárias inatas e inflamatórias, incluindo a modulação de programas transcricionais ligados ao NF-κB. Como componente do sistema celular ubiquitina–proteassoma, a RNF25 contribui para a proteostase e para a terminação de sinais, processos frequentemente perturbados na biologia do cancro e na desregulação imunitária. Assim, alterações na expressão ou na atividade de ligases de ubiquitina como a RNF25 são relevantes para estudos de sinalização de stress, transcrição induzida por citocinas e comunicação cruzada entre vias em células humanas.
RNF25 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF25 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF25. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF25. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF25 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.