RNF185 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-416413

개요

RNF185는 미토콘드리아 외막에 위치한 RING형 E3 유비퀴틴 리가아제를 암호화하며, 특정 기질 단백질에 유비퀴틴을 전달하는 반응을 촉매함으로써 단백질 품질 관리를 돕습니다. 유비퀴틴 의존적 분해(turnover)와 신호전달을 통해 RNF185는 미토콘드리아 항상성 조절, 미토파지 관련 과정, 그리고 미토콘드리아 기능과 선천면역 신호 사이의 상호작용에 관여하는 것으로 보고되어 왔습니다. 자가포식 및 염증 경로와의 상호작용 보고는, 소기관 손상이 하위 전사 프로그램으로 이어지는 스트레스 반응을 연구하는 데 RNF185가 중요함을 뒷받침합니다. RNF185 활성의 변화는 미토콘드리아 기능 이상과 단백질 항상성(프로테오스타시스) 조절 이상이 관련된 맥락, 예를 들어 신경염증과 암 관련 대사 재프로그래밍(대사 재구성) 등에서 연구되어 왔습니다.

RNF185 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RNF185 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RNF185 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RNF185의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RNF185 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RNF185 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RNF185 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RNF185 기능에 중요한 RNF185 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RNF185 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RNF185 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 RNF185 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RNF185 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RNF185 HDR 플라스미드 (h) 및 RNF185 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RNF185 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RNF185 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.