Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) RICK: sc-400731-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RICK consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RICK (h) y el plásmido de doble nickasa RICK (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RIPK2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RICK Anticuerpo (A-10): sc-166765
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RICK | sc-400731-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RICK | sc-400731-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RIPK2 codifica la quinasa citosólica serina/treonina interactuante con receptores 2 (RICK), que actúa como un adaptador clave aguas abajo de los receptores de reconocimiento de patrones NOD1 y NOD2. Al detectar fragmentos de peptidoglucano bacteriano, RICK favorece el ensamblaje, dependiente de poliubiquitinación, de complejos de señalización que activan las vías de NF-κB y MAPK, impulsando la expresión de genes inflamatorios y las respuestas inmunitarias innatas. RICK también se integra con redes de señalización de ubiquitina y puede influir, de manera dependiente del contexto, en respuestas al estrés celular y en la señalización de muerte celular programada. La desregulación de la señalización de RIPK2 se ha vinculado con la biología de enfermedades inflamatorias e inmunomediadas, incluidas vías implicadas en la inflamación intestinal y otros estados inflamatorios crónicos.
RICK El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RIPK2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RIPK2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RIPK2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RIPK2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.