Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Ribosomal Protein S3 Double Nickase Plasmid (h): sc-402327-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Ribosomal Protein S3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Ribosomal Protein S3 Double-Nickase-Plasmid (h) und Ribosomal Protein S3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf RPS3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Ribosomal Protein S3: sc-376008
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Ribosomal Protein S3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402327-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ribosomal Protein S3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402327-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RPS3 kodiert das humane ribosomale Protein S3, eine zentrale Komponente der kleinen ribosomalen 40S‑Untereinheit, die für eine präzise Initiation der Translation und die Decodierung der mRNA erforderlich ist. Über seine strukturelle Rolle in der Ribosomenbiogenese hinaus wird RPS3 mit zellulären Stressantworten sowie der Regulation von Signalwegen in Verbindung gebracht, die die Proteinsynthese mit Wachstum und der Überwachung von DNA-Schäden koordinieren. Eine veränderte Homöostase ribosomaler Proteine kann die Translationskontrolle und Proteostase stören – Prozesse, die häufig in der Tumorbiologie und anderen Erkrankungen mit dysregulierter Zellproliferation eine Rolle spielen. Daher wird RPS3 umfassend im Kontext der Ribosomenfunktion, stressadaptiver Transkriptionsprogramme und von Mechanismen untersucht, die die Translation mit der Genomintegrität verknüpfen.
Ribosomal Protein S3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des RPS3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von RPS3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die RPS3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit RPS3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.