Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Rho G Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402608
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rho G O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rho G, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rho G Anticorpo (1F3 B3 E5): sc-80015
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rho G Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402608 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RHOG codifica Rho G, um membro da família Rho de pequenas GTPases que funciona como um interruptor molecular, ligando a sinalização por receptores à remodelação do citoesqueleto de actina. Rho G regula a formação de “ruffles” de membrana, o espalhamento celular e a migração ao coordenar vias que convergem na atividade de Rac1 e Cdc42 e ao sustentar a dinâmica de adesão dependente de integrinas. Por meio desses processos, RHOG influencia o tráfego endocítico e funções de células imunes, como a fagocitose e respostas induzidas por antígeno. A desregulação da sinalização de Rho G tem sido investigada em contextos nos quais o controle alterado do citoesqueleto contribui para motilidade celular aberrante e fenótipos inflamatórios, tornando-o relevante para estudos mecanísticos da invasão de células tumorais e do comportamento de células imunes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rho G (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RHOG em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RHOG, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RHOG na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rho G.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RHOG para a investigação da sinalização de Rho G, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RHOG críticos para a função Rho G
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RHOG para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rho G Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rho G Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RHOG. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rho G Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rho G (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RHOG para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RHOG definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.