REV1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425035

概要

Rev1はREV1をコードしており、REV1はYファミリーDNAポリメラーゼの一種である。REV1は、損傷乗り越えDNA合成（TLS）において特殊な足場タンパク質として機能するとともに、デオキシシチジル転移酵素としても働き、嵩高いDNA損傷部位を越えて複製を進行させることを可能にする。REV1は他のTLSポリメラーゼとの相互作用を介して損傷バイパスを調整し、複製フォークの進行とゲノム完全性を維持するDNA損傷応答ネットワークとも統合されている。マウス細胞では、Rev1の活性が突然変異誘発率や、複製ストレス下におけるエラー多発型とエラーフリー型の損傷処理のバランスに影響する。REV1依存経路の制御不全は、ゲノム不安定性、発がん機構、ならびに遺伝毒性ストレス因子に対する細胞感受性の研究に関連する。

REV1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRev1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Rev1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Rev1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、REV1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、REV1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Rev1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• REV1の機能に不可欠なRev1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Rev1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• REV1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびREV1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Rev1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  REV1 HDRプラスミド（m）および REV1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRev1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRev1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。