REV1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425035

개요

Rev1은 Y-패밀리 DNA 중합효소인 REV1을 암호화하며, 손상 우회(translesion) DNA 합성에서 특수화된 스캐폴드이자 데옥시시티딜 전이효소로 기능하여 부피가 큰 DNA 손상을 가로질러서도 복제가 진행될 수 있도록 합니다. REV1은 다른 TLS 중합효소들과 상호작용함으로써 손상 우회를 조율하고, 복제 포크의 진행과 유전체 무결성을 유지하는 DNA 손상 반응 네트워크와도 연계됩니다. 마우스 세포에서 Rev1의 활성은 돌연변이 발생률과, 복제 스트레스 상황에서 오류 유발성(error-prone) 및 오류 억제성(error-free) 손상 처리 간의 균형에 영향을 미칩니다. REV1 의존 경로의 조절 이상은 유전체 불안정성, 발암 기전, 그리고 유전독성 스트레스 요인에 대한 세포 감수성 연구와 관련이 있습니다.

REV1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Rev1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Rev1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Rev1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 REV1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 REV1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Rev1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• REV1 기능에 중요한 Rev1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Rev1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• REV1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 REV1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Rev1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  REV1 HDR 플라스미드 (m) 및 REV1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Rev1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Rev1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.