RENBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422648

概要

Renbpは、レニン結合タンパク質（RENBP）をコードしており、レニン–アンジオテンシン系の構成要素や、それに関連するタンパク質分解（プロテオリシス）処理経路の調節に関与するとされる膜結合性タンパク質である。マウス組織では、RENBPの発現がレニンの利用可能性の調節や、血管緊張、電解質恒常性、炎症応答に影響する下流シグナルの制御と関連づけられている。これらのつながりから、Renbpは血圧調節や心代謝ストレス経路の機序研究において重要である。さらに、レニン–アンジオテンシンシグナルの異常は腎・心血管系の病態とも関連するため、Renbpは、プロテアーゼ制御と全身生理を結び付ける遺伝子ネットワークを解析するうえで有用な結節点となる。

RENBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRenbp遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Renbp内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Renbpのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RENBPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RENBPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Renbp欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RENBPの機能に不可欠なRenbpエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Renbpゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RENBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRENBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Renbp遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RENBP HDRプラスミド（m）および RENBP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRenbpホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRenbp標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。