Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) REEP1: sc-407088-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)REEP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa REEP1 (h) y el plásmido de doble nickasa REEP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a REEP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: REEP1 Anticuerpo (A-8): sc-393242
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) REEP1 | sc-407088-NIC | 20 µg | $410.00 |
REEP1 (proteína 1 que potencia la expresión de receptores) es una proteína de membrana del retículo endoplásmico (RE) implicada en el modelado de los túbulos del RE y en el mantenimiento de la arquitectura del RE en neuronas. Participa en las interacciones RE–microtúbulo y favorece el tráfico intracelular de membranas y el crecimiento de neuritas, procesos estrechamente vinculados al mantenimiento axonal y a la función sináptica. La actividad alterada de REEP1 se asocia con fenotipos neurodegenerativos, en especial con la paraplejia espástica hereditaria, lo que resalta su relevancia para las vías que gobiernan la integridad de las neuronas corticospinales. Por ello, el estudio experimental de REEP1 resulta útil para investigar la morfogénesis del RE, la proteostasis y la dinámica de orgánulos en modelos celulares humanos.
REEP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus REEP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de REEP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de REEP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con REEP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.