RBMX2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412228-NIC

RBMX2 codifica uma proteína de ligação a RNA da família RBMX, implicada na regulação pós-transcricional, incluindo o splicing de pré-mRNA e outros eventos de processamento de RNA que moldam o repertório de isoformas de transcritos. Por meio de interações com complexos ribonucleoproteicos e com a maquinaria do spliceossomo, a RBMX2 está posicionada para influenciar o controle co- e pós-transcricional da expressão gênica, impactando a progressão do ciclo celular, a manutenção do genoma e programas responsivos ao estresse. A regulação alterada de vias de processamento de RNA é uma característica recorrente da transformação maligna e de distúrbios do desenvolvimento, tornando a RBMX2 um alvo útil para dissecar como fatores associados ao splicing modulam fenótipos celulares. Assim, a RBMX2 humana é relevante para estudos que conectam proteínas ligadoras de RNA ao acoplamento entre transcrição e splicing e à remodelação do transcriptoma associada a doenças.

RBMX2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RBMX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RBMX2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RBMX2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RBMX2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.