RBMX CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417339

概要

ヒトRBMX（RNA binding motif protein X-linked）は核内のRNA結合タンパク質で、新生転写産物に結合し、pre-mRNAスプライシング、mRNA成熟、ならびに転写とRNAプロセシングの協調に寄与します。RBMXは、DNA損傷応答や複製関連過程における役割を通じてゲノム維持とも関連しており、細胞周期進行中の染色体完全性の保持を支えます。スプライソーム関連経路への関与や転写産物アイソフォームの産生制御を介して、RBMXは増殖やストレス応答を司る遺伝子発現プログラムに影響し得ます。RBMXの発現や機能の破綻は、RNAプロセシング異常およびゲノム安定性低下が共通の病因的特徴としてみられる、がんや発生に関連する状況で報告されています。

RBMX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRBMX遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RBMX内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RBMXのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RBMXタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RBMXシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RBMX欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RBMXの機能に不可欠なRBMXエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RBMXゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RBMX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRBMX CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RBMX遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RBMX HDRプラスミド（h）および RBMX HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRBMXホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRBMX標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。