Plasmide Double Nickase (h) RBM7: sc-408808-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RBM7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RBM7 Double Nickase (h) et le plasmide RBM7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RBM7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RBM7 | sc-408808-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RBM7 | sc-408808-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM7 code une protéine liant l’ARN qui constitue un composant central du complexe NEXT (Nuclear Exosome Targeting), reliant la reconnaissance de l’ARN au recrutement de l’exosome à ARN pour la dégradation de transcrits nucléaires de courte durée de vie et aberrants. En régulant les produits d’une transcription pervasive, les transcrits en amont des promoteurs et les ARN non codants, RBM7 contribue au contrôle qualité des ARN, à l’homéostasie transcriptionnelle et à l’intégrité du génome. La surveillance des ARN dépendante de RBM7 recoupe des processus tels que la transcription par l’ARN polymérase II, la maturation des ARN et les réponses au stress cellulaire. La dérégulation du métabolisme des ARN et l’altération des voies de dégradation des ARN nucléaires auxquelles participe RBM7 sont pertinentes pour les études mécanistiques du cancer et de la neurodégénérescence, où l’instabilité du transcriptome est une caractéristique fréquente.
RBM7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RBM7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RBM7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RBM7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RBM7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.