Ras-GRF2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404141
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ras-GRF2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Ras-GRF2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ras-GRF2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404141 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O RASGRF2 codifica a Ras-GRF2, um fator de troca de nucleotídeos de guanina regulado por cálcio e fosfolipídios que ativa Ras e pequenas GTPases relacionadas para controlar a dinâmica da sinalização MAPK/ERK. A Ras-GRF2 integra sinais provenientes da atividade neuronal e da sinalização mediada por receptores, influenciando a plasticidade sináptica, o crescimento de neuritos e a remodelação do citoesqueleto por meio de quinases downstream e de vias da família Rho. Ao modular programas transcricionais dependentes de Ras, o RASGRF2 afeta estados de proliferação e diferenciação celular de maneira dependente do contexto. O acoplamento desregulado da via de Ras envolvendo a Ras-GRF2 tem sido investigado em modelos de neurobiologia e de sinalização relacionada ao câncer, nos quais a ativação alterada de GTPases pode remodelar respostas de crescimento e sobrevivência.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ras-GRF2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RASGRF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RASGRF2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RASGRF2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ras-GRF2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RASGRF2 para a investigação da sinalização de Ras-GRF2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RASGRF2 críticos para a função Ras-GRF2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RASGRF2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Ras-GRF2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Ras-GRF2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RASGRF2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Ras-GRF2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Ras-GRF2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RASGRF2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RASGRF2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.