Plasmide Double Nickase (h) RARS2: sc-412751-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RARS2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RARS2 Double Nickase (h) et le plasmide RARS2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RARS2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RARS2 | sc-412751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RARS2 | sc-412751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RARS2 code pour l’arginyl‑ARNt synthétase mitochondriale, une enzyme essentielle qui ligature l’arginine à son ARNt cognat afin de soutenir la traduction mitochondriale et la phosphorylation oxydative. En maintenant la synthèse des sous‑unités de la chaîne respiratoire codées par le génome mitochondrial, RARS2 relie le chargement des ARNt par les aminoacyl‑ARNt synthétases à l’assemblage de la chaîne de transport d’électrons, à la production d’ATP et aux réponses au stress mitochondrial. Une altération de la fonction de RARS2 a été associée à des phénotypes de maladies mitochondriales caractérisés par un métabolisme énergétique perturbé et une atteinte du neurodéveloppement, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier les relations entre génotype et fonction mitochondriale. Son activité recoupe des voies qui régissent le fonctionnement du ribosome mitochondrial, la protéostasie et la signalisation intégrée du stress.
RARS2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RARS2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RARS2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RARS2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RARS2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.