Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Rad23B: sc-402106-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Rad23B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Rad23B (h) y el plásmido de doble nickasa Rad23B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RAD23B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rad23B Anticuerpo (H-8): sc-137088
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Rad23B | sc-402106-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Rad23B | sc-402106-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **RAD23B** codifica Rad23B, un receptor de ubiquitina y factor de reparación del ADN que acopla la reparación por escisión de nucleótidos (NER) con la proteostasis mediante interacciones con el proteasoma 26S. Rad23B participa en el reconocimiento y procesamiento de lesiones del ADN que distorsionan la hélice y contribuye al mantenimiento del genoma tras daño por radiación UV y agentes químicos, a la vez que modula la degradación dependiente de ubiquitina al unirse a sustratos ubiquitinados. A través de estas funciones, **RAD23B** respalda las respuestas celulares al estrés replicativo y las vías de señalización por daño en el ADN que influyen en el control del ciclo celular. La desregulación de las vías de NER y del sistema ubiquitina–proteasoma en las que participa **RAD23B** se ha asociado con estabilidad genómica alterada y fenotipos relevantes para el cáncer en modelos experimentales.
Rad23B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RAD23B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RAD23B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RAD23B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RAD23B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.