Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Rad21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422577
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rad21 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rad21, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rad21 Anticorpo (B-2): sc-271601
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rad21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422577 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Rad21 codifica uma subunidade central do complexo coesina, que estabiliza a coesão entre cromátides-irmãs e organiza a estrutura da cromatina em níveis superiores. Por meio do carregamento da coesina e de sua liberação regulada durante o ciclo celular, RAD21 sustenta a segregação cromossômica correta, o reparo de quebras de dupla fita no DNA e a estabilidade da forquilha de replicação, conectando-se às vias de manutenção do genoma. A formação de loops de cromatina mediada por RAD21 também contribui para a regulação da transcrição ao coordenar contatos entre enhancer e promotor e interações com fatores como o CTCF. A ruptura ou desregulação de componentes da coesina, incluindo RAD21, está associada à instabilidade cromossômica e a fenótipos de desenvolvimento relacionados à coesina, tornando Rad21 um alvo-chave para estudos mecanísticos em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rad21 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rad21 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rad21, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rad21 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rad21.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rad21 para a investigação da sinalização de Rad21, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rad21 críticos para a função Rad21
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rad21 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rad21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Rad21 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rad21. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rad21 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Rad21 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rad21 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rad21 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.