Plasmide Double Nickase (m) PTP1B: sc-422502-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) PTP1B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PTP1B Double Nickase (m) et le plasmide PTP1B Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ptpn1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) PTP1B | sc-422502-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Ptpn1** code la protéine tyrosine phosphatase 1B (PTP1B), une phosphatase associée au réticulum endoplasmique (RE) qui déphosphoryle les récepteurs à activité tyrosine kinase ainsi que des intermédiaires clés de signalisation afin de limiter les réponses aux facteurs de croissance et aux cytokines. PTP1B est un régulateur négatif majeur de la signalisation des récepteurs de l’insuline et de la leptine, modulant la dynamique des voies PI3K–AKT et MAPK ainsi que l’expression génique métabolique en aval. En modulant l’activation de JAK/STAT et les états de phosphorylation des récepteurs, PTP1B influence la signalisation inflammatoire, l’adhérence cellulaire et les réponses au stress. Une activité dérégulée de Ptpn1/PTP1B est largement étudiée dans le contexte de la résistance à l’insuline, des dysfonctions métaboliques liées à l’obésité et du remodelage de la signalisation impliqué dans le cancer, ce qui en fait un outil pertinent pour la dissection des voies et les études génotype–phénotype dans des modèles murins.
PTP1B Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ptpn1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ptpn1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ptpn1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ptpn1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.