Plásmido Doble Nickase (h) PRX VI: sc-401549-NIC

PRDX6 codifica la peroxirredoxina 6 (PRX VI), una enzima antioxidante bifuncional con actividades de glutatión peroxidasa y fosfolipasa A2 que ayudan a mantener el equilibrio redox celular y la homeostasis de los fosfolípidos de membrana. Al limitar la acumulación de peróxido de hidrógeno e hidroperóxidos lipídicos, PRX VI modula la señalización del estrés oxidativo, las respuestas inflamatorias y las vías de supervivencia celular, incluidos procesos vinculados a la función mitocondrial y al metabolismo lipídico. Se ha asociado la alteración de la expresión o actividad de PRDX6 con un manejo desregulado de las especies reactivas de oxígeno y con la peroxidación lipídica, características observadas con frecuencia en trastornos inflamatorios, neurodegeneración y biología del cáncer. Como nodo de reparación redox y lipídica, PRX VI se estudia a menudo en modelos de lesión oxidativa, susceptibilidad a la ferroptosis y señalización adaptativa al estrés.

PRX VI El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PRDX6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PRDX6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PRDX6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PRDX6 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.