Plásmido Doble Nickase (h) PRX IV: sc-402821-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PRX IV consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PRX IV (h) y el plásmido de doble nickasa PRX IV (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PRDX4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PRX IV Anticuerpo (F-2): sc-376668
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PRX IV | sc-402821-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PRX IV | sc-402821-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **PRDX4** codifica la peroxiredoxina IV (PRX IV), una peroxidasa dependiente de tioles localizada en el retículo endoplásmico y en la vía secretora, que reduce el peróxido de hidrógeno y los peróxidos lipídicos para mantener la homeostasis redox. Al acoplar la detoxificación de peróxidos con la formación de puentes disulfuro, PRX IV favorece el plegamiento oxidativo de proteínas, la proteostasis del RE y la atenuación de la señalización de la respuesta a proteínas mal plegadas bajo estrés oxidativo. La actividad de PRDX4 se integra con vías reguladas por el estado redox que controlan la secreción, la inflamación y la supervivencia celular, y se ha asociado una expresión o un estado de oxidación alterados con fenotipos de estrés oxidativo descritos en oncología, disfunción metabólica y contextos cardiovasculares e inflamatorios. Como enzima redox secretada/del RE, PRX IV se estudia con frecuencia por su impacto en el amortiguamiento de ROS extracelulares y luminales y la consiguiente modulación de programas transcripcionales adaptativos al estrés.
PRX IV El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PRDX4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PRDX4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PRDX4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PRDX4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.