PRR14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433320
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRR14 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PRR14, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRR14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433320 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Prr14 codifica a PRR14, uma proteína nuclear rica em prolina implicada na organização da arquitetura nuclear por meio de interações com a lâmina nuclear e a cromatina. A PRR14 contribui para ancorar a heterocromatina à periferia do núcleo, influenciando o estado epigenético, a estabilidade do genoma e alterações na organização nuclear ligadas ao ciclo celular. A regulação alterada dos contatos entre a lâmina nuclear e a cromatina tem sido associada a defeitos em programas de diferenciação e a sinalização proliferativa aberrante, tornando a PRR14 um ponto útil para estudar a regulação gênica dependente do envelope nuclear. Em sistemas murinos, a perturbação de Prr14 pode ajudar a investigar como a organização espacial do genoma se conecta ao controle transcricional e a vias responsivas ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRR14 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Prr14 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Prr14, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Prr14 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRR14.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Prr14 para a investigação da sinalização de PRR14, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Prr14 críticos para a função PRR14
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Prr14 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PRR14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PRR14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Prr14. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PRR14 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PRR14 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Prr14 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Prr14 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.