Profilin-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403456

Descripción general

PFN2 codifica la profilina-2, una proteína de unión a monómeros de actina que regula la dinámica de la polimerización de actina y la remodelación del citoesqueleto. La profilina-2 modula el ensamblaje de filamentos en respuesta a la señalización por fosfoinosítidos y a ligandos ricos en prolina, coordinando procesos como el crecimiento de neuritas, el transporte de vesículas sinápticas y la plasticidad de espinas dependiente de la actividad. A través de su papel en la organización de la red de actina, PFN2 contribuye a vías que gobiernan cambios en la forma celular, la dinámica de membrana y comportamientos relacionados con la migración. Se han investigado la función alterada de la profilina-2 y el control citoesquelético aguas abajo en el contexto de la conectividad neuronal y de fenotipos del neurodesarrollo o neurodegenerativos en los que se altera la homeostasis de la actina.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Profilin-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PFN2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PFN2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PFN2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Profilin-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PFN2 para la investigación de la señalización de Profilin-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PFN2 críticos para la función de Profilin-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PFN2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Profilin-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Profilin-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PFN2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Profilin-2 (h) y el plásmido HDR Profilin-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PFN2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PFN2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.