Partículas Lentivirales de Activación (h) PRMT7: sc-417516-LAC

PRMT7 codifica la proteína arginina metiltransferasa 7, una PRMT predominantemente de tipo III que cataliza la dimetilación simétrica de residuos de arginina en sustratos histónicos y no histónicos. A través de esta regulación epigenética y postraduccional, PRMT7 influye en la organización de la cromatina, el control transcripcional y procesos asociados al ARN que determinan la diferenciación celular y las respuestas al estrés. La actividad de PRMT7 se entrecruza con la señalización del daño del ADN y con programas génicos metabólicos e inflamatorios al modular interacciones proteína–proteína y la accesibilidad de los factores de transcripción. La expresión o señalización desregulada de PRMT7 se ha vinculado con una capacidad proliferativa alterada y con la especificación de linajes en el cáncer y otros trastornos en los que la remodelación epigenética contribuye a la fisiopatología.

Las partículas de activación lentiviral PRMT7 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de PRMT7 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral PRMT7 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción PRMT7, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de PRMT7. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo PRMT7 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.