PRH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406292

Visão geral

PRH2 (proteína rica em prolina, subfamília HaeIII 2) codifica uma proteína salivar secretada, rica em prolina, expressa principalmente nas glândulas salivares e liberada na cavidade oral. Proteínas derivadas de PRH2 contribuem para a composição e as propriedades físico-químicas da saliva, apoiando a lubrificação, a formação da película do esmalte e as interações com componentes da dieta e com a microbiota oral. A variação nas proteínas salivares ricas em prolina tem sido estudada no contexto das interações hospedeiro–microrganismo, da ecologia oral e da suscetibilidade a condições inflamatórias orais, nas quais a ligação da proteína a superfícies e a adesão microbiana podem influenciar processos imunes locais e de barreira. Como um fator secretado altamente expresso em um contexto de expressão restrita a um tecido, PRH2 fornece um modelo útil para dissecar a regulação gênica da secreção e a função proteica em sistemas epiteliais e glandulares orais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRH2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PRH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PRH2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PRH2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRH2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PRH2 para a investigação da sinalização de PRH2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PRH2 críticos para a função PRH2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PRH2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PRH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PRH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PRH2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PRH2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PRH2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PRH2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PRH2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.