PRH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422429
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRH1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PRH1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422429 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Prh1 codifica a PRH1, uma proteína secretada rica em prolina, predominantemente associada às glândulas salivares e aos tecidos da mucosa oral em camundongos. Acredita-se que a PRH1 contribua para a composição da saliva e para funções locais de barreira ao participar de redes proteicas extracelulares que influenciam a lubrificação e a proteção da mucosa. Como fator secretado com expressão restrita a determinados tecidos, Prh1 é útil para estudar programas de diferenciação epitelial e a regulação gênica em glândulas exócrinas. Alterações na expressão de proteínas salivares podem ser informativas em modelos de inflamação oral, disfunção de glândulas salivares e mudanças induzidas pelo ambiente na homeostase da mucosa.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRH1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Prh1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Prh1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Prh1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRH1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Prh1 para a investigação da sinalização de PRH1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Prh1 críticos para a função PRH1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Prh1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PRH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PRH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Prh1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PRH1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PRH1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Prh1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Prh1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.