PRH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422429

概要

Prh1はPRH1をコードしており、PRH1はマウスにおいて主に唾液腺および口腔粘膜組織に関連する分泌性のプロリンリッチタンパク質であるとされています。PRH1は、粘膜の潤滑や保護に影響する細胞外タンパク質ネットワークに関与することで、唾液成分の形成や局所的なバリア機能に寄与すると考えられています。組織特異的に発現する分泌因子として、Prh1は上皮分化プログラムや外分泌腺における遺伝子制御を研究する上で有用です。唾液タンパク質の発現変化は、口腔炎症、唾液腺機能障害、ならびに環境要因によって誘導される粘膜恒常性の変化を扱うモデルにおいて、有益な指標となり得ます。

PRH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPrh1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Prh1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Prh1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRH1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRH1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Prh1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRH1の機能に不可欠なPrh1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Prh1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびPRH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Prh1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRH1 HDRプラスミド（m）および PRH1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPrh1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPrh1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。