Plasmide Double Nickase (h) PLRP2: sc-409664-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PLRP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PLRP2 Double Nickase (h) et le plasmide PLRP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PNLIPRP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PLRP2 Antibody (D-1): sc-376236
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PLRP2 | sc-409664-NIC | 20 µg | $410.00 |
PNLIPRP2 code la protéine 2 apparentée à la lipase pancréatique (PLRP2), une lipase sécrétée qui contribue à l’hydrolyse des triacylglycérols alimentaires et de lipides apparentés dans la lumière intestinale. PLRP2 participe à des processus digestifs et métaboliques qui influencent l’absorption intestinale des lipides, la production en aval de chylomicrons et l’homéostasie énergétique systémique. Les variations de l’activité des lipases digestives sont pertinentes pour l’étude des phénotypes de malabsorption et des dérégulations métaboliques, et PLRP2 est souvent examinée aux côtés d’autres enzymes pancréatiques afin de comprendre la fonction coordonnée du pancréas exocrine. En recherche biomédicale, PNLIPRP2 constitue un nœud d’étude accessible pour explorer la prise en charge des lipides à l’interface intestin–pancréas et les conséquences d’une lipolyse luminale altérée sur les voies inflammatoires et métaboliques.
PLRP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PNLIPRP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PNLIPRP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PNLIPRP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PNLIPRP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.