Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) plakophilin 2: sc-426568-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) plakophilin 2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide plakophilin 2 Double Nickase (m) et le plasmide plakophilin 2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Pkp2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: plakophilin 2 Antibody (C-1): sc-393711
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) plakophilin 2 | sc-426568-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Pkp2** code la plakophiline 2, une protéine à répétitions armadillo qui se localise aux desmosomes et coordonne l’assemblage ainsi que la stabilité des jonctions intercellulaires dans des tissus soumis à des contraintes mécaniques. La plakophiline 2 soutient l’organisation des complexes desmogléine/desmocolline et relie les composants jonctionnels aux réseaux de filaments intermédiaires, influençant l’adhésion cellule–cellule, l’intégrité tissulaire et la dynamique du cytosquelette. Par ses rôles dans la signalisation jonctionnelle et la mécanotransduction, PKP2 interfère avec des voies qui régissent l’architecture épithéliale et les propriétés de conduction cardiaque. Une altération de la fonction de PKP2 est associée à un dysfonctionnement des desmosomes et à des phénotypes de cardiomyopathie arythmogène, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude du remodelage cardiaque, de la biologie des jonctions et des mécanismes de défaillance tissulaire induits par le stress.
plakophilin 2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Pkp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Pkp2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Pkp2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Pkp2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.