Placental lactogen II CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422277

概要

Prl3b1は、妊娠期間中に主として栄養膜系譜で発現する、プロラクチン／成長ホルモンファミリーに属するサイトカインであるマウス胎盤ラクトゲンIIをコードします。胎盤ラクトゲンIIは、プロラクチン受容体（PRLR）シグナル伝達を介して、下流のJAK2–STAT5による転写プログラムを調節し、栄養の取り扱いや母体組織のリモデリングに影響を与えるなど、内分泌・代謝過程を調整することで母体—胎児の適応を支えます。胎盤では、Prl3b1の機能は栄養膜の分化および母体生理の調節と関連しており、胎盤発生と内分泌クロストークの研究において重要です。モデル系では、胎盤ラクトゲンのシグナル異常が胎児発育の変化や妊娠合併症と関連づけられており、Prl3b1は胎盤機能不全の機序解明に有用な標的遺伝子座となります。

Placental lactogen II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPrl3b1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Prl3b1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Prl3b1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Placental lactogen IIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Placental lactogen IIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Prl3b1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Placental lactogen IIの機能に不可欠なPrl3b1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Prl3b1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Placental lactogen II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびPlacental lactogen II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Prl3b1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Placental lactogen II HDRプラスミド（m）および Placental lactogen II HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPrl3b1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPrl3b1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。