Pim-1 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-400376-LAC-2

Das humane Gen PIM1 kodiert Pim‑1, eine konstitutiv aktive Serin/Threonin‑Kinase, die Zytokin‑ und Wachstumsfaktorsignale integriert, um Zellüberleben, Zellzyklusprogression und transkriptionelle Antworten zu regulieren. Pim‑1 wirkt nachgeschaltet von Signalwegen wie JAK/STAT und kooperiert mit der PI3K‑AKT‑ sowie der NF‑κB‑Signalgebung, wobei es die Phosphorylierung von Substraten beeinflusst, die an der Kontrolle der Apoptose (z. B. BAD) und an Proliferationsprogrammen beteiligt sind. Eine dysregulierte PIM1‑Expression oder ‑Aktivität wurde mit aberrantem Wachstum hämatopoetischer und lymphoider Zellen in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext onkogener Signalnetzwerke und von Mechanismen der Therapieresistenz untersucht. Das Gene Editing von PIM1 unterstützt mechanistische Studien zur kinasegetriebenen Signalübertragung, die phosphoproteomische Kartierung von Signalwegen sowie funktionelle Genomik‑Screens in Modellen der Krebsbiologie und Immunologie.

Pim-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PIM1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Pim-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PIM1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Pim-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PIM1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.