PIDD CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403439

概要

PIDD1は、p53によって誘導されるデスドメインタンパク質PIDDをコードしており、細胞ストレス応答やアポトーシス制御に関与するシグナル伝達の足場（スキャフォールド）タンパク質として知られています。PIDDはPIDDosomeなどの多タンパク質複合体の形成に関与し、遺伝毒性ストレスをカスパーゼ2の活性化およびその後の細胞運命決定へと結び付けます。アポトーシスにとどまらず、PIDDは中心体に関連する過程や、細胞周期制御とゲノム安定性に影響するDNA損傷シグナル伝達との関連も報告されています。これらの経路の破綻は、がん生物学、神経発達表現型、ならびにストレスシグナル、アポトーシス、あるいは染色体維持が乱れるその他の疾患の研究において重要です。

PIDD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPIDD1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PIDD1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PIDD1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PIDDタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PIDDシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PIDD1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PIDDの機能に不可欠なPIDD1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PIDD1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PIDD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPIDD CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PIDD1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PIDD HDRプラスミド（h）および PIDD HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPIDD1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPIDD1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。