periaxin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404868

概要

PRXは、シュワン細胞に豊富に発現する足場タンパク質であるペリアキシン（periaxin）をコードしており、末梢神経ミエリンの安定性と維持に必須です。ペリアキシンは細胞骨格の組織化や膜ドメイン構築に関与し、シュワン細胞の伸長を支えるとともに、軸索―グリア相互作用を制御するミエリン関連複合体の形成を促進します。PRXの破綻はミエリン恒常性や神経伝導を乱し、ペリアキシン機能の異常は、Charcot–Marie–Tooth病4F型やDejerine–Sottas様表現型を含む遺伝性末梢ニューロパチーと関連づけられています。そのためPRXは、ミエリン化の制御、シュワン細胞分化、ならびに末梢神経の健全性に影響するストレス応答に関わる経路の研究で広く注目されています。

periaxin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPRX遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PRX内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PRXのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、periaxinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、periaxinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PRX欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• periaxinの機能に不可欠なPRXエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PRXゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• periaxin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびperiaxin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PRX遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  periaxin HDRプラスミド（h）および periaxin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPRXホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPRX標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。