Peptide YY CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403446

概要

PYYはペプチドYYをコードしており、ペプチドYYは腸管由来の内分泌ペプチドで、主に栄養摂取に応答して腸内分泌L細胞から分泌されます。その後、生理活性型へとプロセシングされ、ニューロペプチドY受容体ファミリー（とりわけY2）を介してシグナルを伝達します。ペプチドYYは、腸—脳軸回路における消化管運動、分泌、ならびに満腹シグナルを調節し、腸内分泌の情報を視床下部および迷走神経経路と統合します。これらの受容体介在性GPCRプロセスを通じて、PYYはエネルギーホメオスタシスと代謝調節に寄与し、その発現パターンの変化は肥満、2型糖尿病、消化管疾患と関連づけられています。PYYはまた、腸内分泌細胞の分化や腸上皮生物学を研究する際のマーカーとしても用いられます。

Peptide YY CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPYY遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PYY内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PYYのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Peptide YYタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Peptide YYシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PYY欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Peptide YYの機能に不可欠なPYYエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PYYゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Peptide YY CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPeptide YY CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PYY遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Peptide YY HDRプラスミド（h）および Peptide YY HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPYYホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPYY標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。