Pepsin A4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418415
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pepsin A4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Pepsin A4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pepsin A4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-418415 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PGA4 codifica a pepsina A4, uma endopeptidase aspártica produzida como um zimogénio secretado na mucosa gástrica e ativada em condições ácidas para clivar proteínas alimentares e endógenas. Como membro da família das pepsinas, a pepsina A4 contribui para a proteostase gastrointestinal, influenciando a geração de péptidos, a digestão de proteínas no lúmen e a disponibilidade subsequente de antigénios e nutrientes. A sua atividade está integrada com a biologia do ácido gástrico e com processos da barreira mucosa, e a expressão alterada ou o desequilíbrio de proteases é frequentemente avaliado em estudos de remodelação do epitélio gástrico e de patologia associada à inflamação. Assim, o PGA4 é relevante para dissecar vias dependentes de proteases no estômago e para investigação orientada a biomarcadores em contextos de doença gástrica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pepsin A4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PGA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PGA4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PGA4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pepsin A4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PGA4 para a investigação da sinalização de Pepsin A4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PGA4 críticos para a função Pepsin A4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PGA4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Pepsin A4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Pepsin A4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PGA4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Pepsin A4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Pepsin A4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PGA4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PGA4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.