Plasmide Double Nickase (h) PELP1: sc-405376-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PELP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PELP1 Double Nickase (h) et le plasmide PELP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PELP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PELP1 Antibody (E-1): sc-390599
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PELP1 | sc-405376-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PELP1 | sc-405376-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PELP1 (protéine 1 riche en proline, acide glutamique et leucine) est un corégulateur des récepteurs nucléaires qui intègre la signalisation du récepteur des œstrogènes et d’autres récepteurs stéroïdiens avec le remodelage de la chromatine et le contrôle transcriptionnel. Elle agit comme une plateforme d’assemblage de complexes reliant l’expression génique induite par les récepteurs à la progression du cycle cellulaire, à la biogenèse des ribosomes et aux voies de réponse aux dommages de l’ADN, et peut navetter entre le noyau et le cytoplasme afin de moduler la signalisation des kinases. Par ces interactions, PELP1 contribue à des programmes transcriptionnels sensibles aux hormones ainsi qu’à des réseaux régulateurs plus larges qui influencent la prolifération, la survie et la stabilité du génome. Une expression ou une localisation dérégulée de PELP1 a été associée à une signalisation oncogénique altérée et à la progression tumorale dans plusieurs contextes de cancer, ce qui soutient son utilisation comme cible mécanistique dans des études centrées sur des voies de signalisation.
PELP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PELP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PELP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PELP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PELP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.