PEBP2β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401983

Visão geral

CBFB codifica a subunidade beta do fator de ligação ao core (PEBP2β), um parceiro que não se liga ao DNA e que forma heterodímeros com fatores de transcrição RUNX para estabilizar a ligação ao DNA e coordenar programas de expressão gênica que controlam a diferenciação hematopoética, a osteogênese e o desenvolvimento de células imunológicas. Por meio desse complexo RUNX/CBF, o CBFB ajuda a regular vias que governam o comprometimento do destino celular, a proliferação e redes transcricionais específicas de linhagem. A disrupção da transcrição dependente de CBFB está implicada em hematopoiese aberrante e defeitos do desenvolvimento, e o CBFB é frequentemente estudado no contexto de rearranjos cromossômicos e desregulação transcricional em modelos de doenças hematológicas. Essas propriedades tornam o CBFB um ponto-chave para investigar a cooperatividade entre fatores de transcrição, a regulação de enhancers e mecanismos de especificação de linhagem.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PEBP2β (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CBFB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CBFB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CBFB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PEBP2β.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CBFB para a investigação da sinalização de PEBP2β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CBFB críticos para a função PEBP2β
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CBFB para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PEBP2β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PEBP2β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CBFB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PEBP2β Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PEBP2β (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CBFB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CBFB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.