Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PDGF Receptor beta/PDGFRB Double Nickase Plasmid (m): sc-422171-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PDGF Receptor beta/PDGFRB Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PDGF Receptor beta/PDGFRB Double-Nickase-Plasmid (m) und PDGF Receptor beta/PDGFRB Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Pdgfrb abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: PDGF Receptor beta/PDGFRB: sc-374573
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PDGF Receptor beta/PDGFRB Double Nickase Plasmid (m) | sc-422171-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDGF Receptor beta/PDGFRB Double Nickase Plasmid (m2) | sc-422171-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **Pdgfrb** kodiert den platelet-derived growth factor receptor beta (**PDGFRB**), eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die während der Gefäßreifung und des Gewebeumbaus die Proliferation, Migration und das Überleben von Perizyten und vaskulären glatten Muskelzellen reguliert. Nach Bindung von PDGF-Liganden aktiviert PDGFRB die kanonischen Signalwege **PI3K–AKT**, **RAS–MAPK** und **PLCγ** und koordiniert über nachgeschaltete Adapterproteine die Zytoskelettdynamik sowie Interaktionen mit der extrazellulären Matrix. In der sich entwickelnden und der adulten Gefäßversorgung unterstützt die PDGFRB-vermittelte Signalgebung die Integrität der Blut-Hirn-Schranke, die Wundheilung und den Austausch zwischen Stroma und Immunsystem. Eine fehlregulierte PDGFRB-Aktivität wird in Mausmodellen häufig als molekularer Readout in Studien zu Angiogenese, Fibrose, entzündlichem Remodeling und tumorassoziierter Stromabiologie genutzt.
PDGF Receptor beta/PDGFRB Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Pdgfrb-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Pdgfrb abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Pdgfrb-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Pdgfrb-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.