PDGF Receptor beta/PDGFRB Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422171-NIC

O gene **Pdgfrb** em camundongos codifica o receptor beta do fator de crescimento derivado de plaquetas (**PDGFRB**), uma tirosina quinase receptora que regula a proliferação, migração e sobrevivência de pericitos e de células de músculo liso vascular durante a maturação dos vasos e a remodelação tecidual. Após a ligação do ligante PDGF, o PDGFRB ativa as cascatas de sinalização canônicas **PI3K–AKT**, **RAS–MAPK** e **PLCγ** e coordena a dinâmica do citoesqueleto e as interações com a matriz extracelular por meio de proteínas adaptadoras a jusante. Na vasculatura em desenvolvimento e na adulta, a sinalização mediada por PDGFRB sustenta a integridade da barreira hematoencefálica, o reparo de feridas e a comunicação entre estroma e sistema imune. A atividade desregulada de PDGFRB é frequentemente utilizada como leitura molecular em estudos de angiogênese, fibrose, remodelamento inflamatório e biologia do estroma associado a tumores em modelos murinos.

PDGF Receptor beta/PDGFRB O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Pdgfrb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Pdgfrb. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Pdgfrb. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Pdgfrb interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.