PDGF Receptor beta/PDGFRB Double Nickaseプラスミド (h): sc-400187-NIC

PDGFRB は、血小板由来増殖因子受容体ベータ（PDGFRβ）をコードする受容体型チロシンキナーゼであり、PDGF リガンドに結合して、ペリサイトおよび血管平滑筋細胞の増殖・遊走・生存を制御します。リガンド結合により二量体化と自己リン酸化が誘導され、PI3K–AKT、RAS–MAPK、PLCγ、STAT 経路を介した下流シグナル伝達が活性化されます。これにより、細胞骨格の再編成、細胞外マトリックス動態、内皮ネットワークの血管新生支持が統合的に調整されます。PDGFRB は、発生過程および組織リモデリングにおける間質-血管間クロストークの中核を担い、線維化、腫瘍微小環境の生物学、血管病変などの研究で頻繁に取り上げられています。PDGFRB シグナルの異常や再構成は増殖性・腫瘍性プロセスと関連づけられており、増殖因子受容体シグナル伝達の依存性を解明する上で重要な結節点となっています。

PDGF Receptor beta/PDGFRB ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における PDGFRB 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、PDGFRB内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、PDGFRBの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、PDGFRBが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。