Plasmide Double Nickase (h) PDGF Receptor alpha/PDGFRA: sc-400107-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PDGF Receptor alpha/PDGFRA correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PDGF Receptor alpha/PDGFRA Double Nickase (h) et le plasmide PDGF Receptor alpha/PDGFRA Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PDGFRA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PDGF Receptor alpha/PDGFRA Antibody (C-9): sc-398206
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PDGF Receptor alpha/PDGFRA | sc-400107-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PDGF Receptor alpha/PDGFRA | sc-400107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PDGFRA code le récepteur alpha du facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGFRα), une tyrosine kinase membranaire qui se lie aux ligands PDGF afin d’induire la dimérisation et l’autophosphorylation. Une fois activé, PDGFRα mobilise des réseaux de signalisation en aval, notamment les voies PI3K–AKT, RAS–MAPK et PLCγ, coordonnant la prolifération, la survie, la migration et la différenciation des lignages mésenchymateux. L’activité de PDGFRA contribue au dialogue stroma–épithélium et au remodelage de la matrice extracellulaire durant le développement et l’homéostasie tissulaire. Une signalisation PDGFRA dérégulée et des altérations structurales sont impliquées dans des programmes de croissance oncogéniques et dans le remodelage fibrotique, ce qui en fait une cible fréquente dans les études portant sur la biologie des tyrosine kinases réceptrices et la signalisation du microenvironnement tumoral.
PDGF Receptor alpha/PDGFRA Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PDGFRA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PDGFRA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PDGFRA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PDGFRA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.