Plásmido Doble Nickase (h) PCYOX1: sc-407075-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PCYOX1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PCYOX1 (h) y el plásmido de doble nickasa PCYOX1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PCYOX1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PCYOX1 Anticuerpo (25): sc-136391
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PCYOX1 | sc-407075-NIC | 20 µg | $410.00 |
PCYOX1 codifica la oxidasa de prenilcisteína 1, una oxidasa dependiente de flavina que cataliza la escisión oxidativa de residuos de prenilcisteína generados durante el recambio de proteínas preniladas. Al procesar metabolitos de cisteína prenilada, PCYOX1 contribuye a la homeostasis lipídica y redox, y se integra con vías vinculadas al tráfico de membranas y a la proteostasis. La alteración de la actividad de PCYOX1 se ha asociado con fenotipos de estrés oxidativo y con señalización inflamatoria, lo que la hace relevante para estudios de disfunción metabólica y biología vascular. En células humanas, la perturbación de PCYOX1 ofrece un punto de entrada abordable para examinar cómo los subproductos de la prenilación influyen en el manejo de especies reactivas de oxígeno y en vías posteriores sensibles al estrés.
PCYOX1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PCYOX1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PCYOX1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PCYOX1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PCYOX1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.