Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
paxillin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416733
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- paxillin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico paxillin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:paxillin Anticorpo (B-2): sc-365379
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
paxillin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-416733 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PXN codifica a paxilina, uma proteína adaptadora de adesão focal que coordena a sinalização de integrinas com a remodelação do citoesqueleto de actina para controlar a adesão, o espalhamento e a migração celular. A paxilina atua como uma plataforma (scaffold) para quinases e proteínas estruturais, incluindo FAK e SRC, conectando sinais da matriz extracelular a vias a jusante como MAPK/ERK e PI3K. Por meio da regulação da renovação (turnover) das adesões focais e da mecanotransdução, a paxilina contribui para processos como reparo de feridas, tráfego de células imunes e respostas celulares induzidas pela matriz extracelular. A desregulação da sinalização da paxilina e da dinâmica das adesões focais é frequentemente investigada no contexto de alterações na motilidade e em fenótipos de invasão celular relevantes para a biologia do câncer e para microambientes fibróticos ou inflamatórios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO paxillin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PXN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PXN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PXN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína paxillin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PXN para a investigação da sinalização de paxillin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PXN críticos para a função paxillin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PXN para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo paxillin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo paxillin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PXN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo paxillin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR paxillin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PXN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PXN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.