Pax-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403899

概要

PAX9は、胚発生のパターニングおよび器官形成に必須の、核内でDNAに結合する調節因子であるペアードボックス型転写因子Pax-9をコードしています。Pax-9は、頭蓋顔面および咽頭の発生、歯の形成（歯の発生）、ならびに上皮―間葉相互作用を制御する転写プログラムを統合的に調節し、PAXファミリー因子やホメオボックス経路を含む、より広範な発生遺伝子ネットワークの中で機能します。ヒト遺伝学では、PAX9機能の変化が先天性の歯の欠如（歯牙欠如）や関連する頭蓋顔面異常と強く関連しており、発生における転写制御を研究するうえで重要な遺伝子座となっています。細胞モデルにおいては、Pax-9は、系譜（ライン）指定、モルフォゲン応答性の遺伝子制御、ならびに下流の分化カスケードを解析するための、扱いやすい標的（ノード）を提供します。

Pax-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPAX9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PAX9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PAX9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Pax-9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Pax-9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PAX9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Pax-9の機能に不可欠なPAX9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PAX9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Pax-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPax-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PAX9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Pax-9 HDRプラスミド（h）および Pax-9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPAX9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPAX9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。