Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Pax-2 (m): sc-422115
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Pax-2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Pax-2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Pax-2 Antibody (60-P): sc-130387
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Pax-2 (m) | sc-422115 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin Pax2 code Pax-2, un facteur de transcription à domaine « paired box » qui régule des programmes d’expression génique au cours de l’organogenèse, en particulier dans le rein en développement, le nerf optique/la rétine et l’oreille interne. Pax-2 intervient dans la spécification des lignages et la différenciation épithéliale en coordonnant des réseaux transcriptionnels du développement et des interactions avec des voies telles que les signalisations WNT et Notch. Une activité altérée de PAX2 est associée à des anomalies congénitales du rein et des voies urinaires ainsi qu’à des défauts du développement oculaire, faisant de Pax2 un marqueur largement utilisé et un nœud mécanistique dans les études de développement et de modélisation des maladies. Dans les systèmes cellulaires, Pax-2 influence la prolifération, la morphogenèse et le maintien de l’identité spécifique des tissus via une liaison directe à l’ADN et des complexes transcriptionnels de répression/activation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Pax-2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Pax2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Pax2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Pax2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Pax-2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Pax2 pour l'étude de la signalisation de Pax-2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Pax2 essentiels à la fonction de Pax-2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Pax2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Pax-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Pax-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Pax2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Pax-2 plasmide HDR (m) et le Pax-2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Pax2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Pax2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.