PARP-7 Double Nickase Plasmid (h): sc-407777-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PARP-7 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PARP-7 Double-Nickase-Plasmid (h) und PARP-7 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf TIPARP abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PARP-7 Double Nickase Plasmid (h) | sc-407777-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PARP-7 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-407777-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TIPARP kodiert PARP-7, eine Mono-ADP-Ribosyltransferase, die die MARylierung von Proteinsubstraten katalysiert, um Signalwege, Transkriptionsprogramme und die Proteostase zu modulieren. PARP-7 wird durch die Aktivität des Aryl-Hydrocarbon-Rezeptors (AHR) induziert und wirkt in xenobiotischen Antwortwegen, wobei es eine Rückkopplungskontrolle über rezeptorabhängige Genexpression und stressadaptive Antworten bereitstellt. Durch die Regulation interferonassoziierter Signalübertragung, der Ubiquitin-Proteasom-Dynamik und nukleärer Transkriptionskomplexe beeinflusst PARP-7 den Tonus der angeborenen Immunität und die zelluläre Anpassung an Umweltreize. Eine dysregulierte TIPARP/PARP-7-Aktivität wurde in der Literatur mit veränderter inflammatorischer Signalgebung und onkogenen Phänotypen in Verbindung gebracht, was ihre Relevanz für mechanistische Studien in der Krebsbiologie und der Immunregulation unterstreicht.
PARP-7 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des TIPARP-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von TIPARP abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die TIPARP-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit TIPARP-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.