PARD6B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401699

概要

PARD6Bは、上皮細胞における頂端—基底極性の確立と維持を助け、非対称細胞分裂を制御するPAR極性複合体の中核構成因子をコードします。PARD6Bは、非典型的PKC（aPKC）やその他の極性制御因子との相互作用を介して、タイトジャンクションの形成、細胞骨格の構築、方向性のある細胞移動を協調的に制御し、極性制御を組織構築を司る経路と結び付けています。極性シグナルの破綻は、上皮構造の乱れ、接着性の変化、浸潤性表現型と関連するため、PARD6Bは腫瘍進展や転移の研究において重要です。PARD6B依存的な極性プログラムは発生や分化の過程でも重要であり、シグナル伝達の空間的制御と接着結合の完全性が器官形成を形作ります。

PARD6B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPARD6B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PARD6B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PARD6Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PARD6Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PARD6Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PARD6B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PARD6Bの機能に不可欠なPARD6Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PARD6Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PARD6B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPARD6B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PARD6B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PARD6B HDRプラスミド（h）および PARD6B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPARD6Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPARD6B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。