PAO CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404683

개요

인간 SMOX 유전자는 폴리아민 산화효소(PAO)를 암호화하는데, 이는 퍼옥시좀에 존재하는 플라빈 의존성 효소로서 스퍼민(spermine)을 산화적으로 역전환하여 스퍼미딘(spermidine)으로 만드는 반응을 촉매하며, 폴리아민 플럭스를 세포의 레독스 균형과 연결한다. 이 반응은 과산화수소와 알데하이드 부산물을 생성하므로, SMOX 활성은 산화 스트레스 신호전달, DNA 손상 반응, 그리고 증식 및 분화 조절과 연관된다. SMOX/PAO는 염색질 역학과 번역에 영향을 미치는 폴리아민 생합성·분해 네트워크와 교차하며, 문헌에서는 그 조절 이상이 염증, 신경퇴행, 암 관련 대사 재편성과 연관된 것으로 보고되어 왔다. 폴리아민 항상성의 한 결절로서 SMOX는 미토콘드리아 기능, 페롭토시스(ferroptosis) 감수성, 그리고 스트레스 적응성 전사 프로그램에 미치는 영향 측면에서 자주 연구된다.

PAO CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SMOX 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SMOX 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SMOX의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PAO 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PAO 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SMOX 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PAO 기능에 중요한 SMOX 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SMOX 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PAO CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PAO CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SMOX 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PAO HDR 플라스미드 (h) 및 PAO HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SMOX 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SMOX 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.