PABPC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422101

Visão geral

Pabpc2 codifica a proteína citoplasmática de ligação à poli(A) 2 (PABPC2), um fator de ligação a RNA que se associa às caudas poli(A) para coordenar a estabilidade do mRNA, a eficiência de tradução e a sua degradação, por meio de interações com a maquinaria de iniciação da tradução e de decaimento de mRNA. Como parte da regulação pós-transcricional da expressão gênica, a PABPC2 contribui para o controle dinâmico de programas de expressão gênica durante respostas ao estresse celular, diferenciação e processos de desenvolvimento em camundongos. Alterações na regulação da cauda poli(A) e no remodelamento de mRNPs citoplasmáticos estão amplamente associadas à desregulação da proteostase e ao metabolismo aberrante de RNA, características comuns em modelos de neurodegeneração, biologia do câncer e sinalização imune. Assim, Pabpc2 serve como um nó útil para investigar vias que conectam decisões sobre o destino do mRNA ao fenótipo celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PABPC2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pabpc2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pabpc2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pabpc2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PABPC2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pabpc2 para a investigação da sinalização de PABPC2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pabpc2 críticos para a função PABPC2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pabpc2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PABPC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PABPC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pabpc2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PABPC2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PABPC2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pabpc2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pabpc2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.