Plásmido Doble Nickase (m) p38 alpha MAPK14: sc-424051-NIC

Mouse Mapk14 codifica p38α (MAPK14), una quinasa de serina/treonina activada por el estrés que integra citocinas inflamatorias, estrés oxidativo y estímulos ambientales para moldear las respuestas celulares. p38α actúa en la cascada de señalización MAPK, regulando programas de fosforilación que controlan la transcripción, la estabilidad del ARNm, la apoptosis, la diferenciación y los puntos de control del ciclo celular mediante dianas aguas abajo como MAPKAPK2/3 y factores de transcripción, incluidos ATF2 y CREB. En los compartimentos inmunitario y estromal, MAPK14 contribuye a la producción de citocinas y a la señalización de la inmunidad innata, vinculando las respuestas celulares al estrés con la homeostasis tisular. La actividad desregulada de p38α se ha implicado en la fisiopatología asociada a la inflamación, en procesos neuroinflamatorios y en la biología del microambiente tumoral, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos en diversos modelos murinos de enfermedad.

p38 alpha MAPK14 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Mapk14 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Mapk14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Mapk14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Mapk14 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.