Date published: 2026-7-19

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P2Y1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401759

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • P2Y1 CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(h) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在P2Y1基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:P2Y1: sc-377324,通过WB, IF或者IHC分析
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    P2Y1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h)

    sc-401759
    20 µg
    $397.00

    概述

    P2RY1 编码人类 P2Y1 受体,这是一种 G 蛋白偶联的嘌呤能受体,主要由细胞外 ADP 激活,从而启动 Gq/PLCβ 信号传导、IP3 介导的 Ca2+ 动员,并引发下游 PKC/MAPK 通路反应。P2Y1 通过感知核苷酸,参与调控血小板的激活与聚集、血管张力,以及在内皮和免疫相关环境中的细胞间通讯。在神经系统中,P2Y1 信号可调节胶质细胞活性与突触网络动力学,将嘌呤能线索与炎症及神经调制过程联系起来。P2RY1 活性失调与血栓形成及心血管相关表型有关;同时也在更广泛的研究背景下受到关注,包括神经炎症以及肿瘤微环境信号传导等领域,在这些过程中细胞外核苷酸会塑造细胞行为。

    P2Y1 CRISPR/Cas9 KO质粒(h)是一组旨在针对性地破坏human细胞系中P2RY1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对P2RY1基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏P2RY1开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使P2Y1蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建P2RY1缺失的细胞模型,用于P2Y1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 P2Y1 功能至关重要的 P2RY1 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 P2RY1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 P2Y1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 P2Y1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 P2RY1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 P2Y1 HDR 质粒(h)编码的 HDR 供体构建体以及 P2Y1 HDR质粒(h2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由P2RY1同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定P2RY1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。