Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) P2X4: sc-401779-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) P2X4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide P2X4 Double Nickase (h) et le plasmide P2X4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant P2RX4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: P2X4 Antibody (D-3): sc-518167
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) P2X4 | sc-401779-NIC | 20 µg | $410.00 |
P2RX4 code le récepteur humain P2X4, un canal cationique non sélectif activé par l’ATP, qui médie une entrée rapide de Ca²⁺ et de Na⁺ en réponse aux nucléotides extracellulaires. La signalisation via P2X4 contribue à la neurotransmission purinergique, à l’activation de la microglie et au dialogue inflammatoire, en s’intégrant à des voies qui régulent la libération de cytokines, la chimiotaxie et l’excitabilité cellulaire. Dans les contextes immunitaire et du système nerveux, l’activité de P2X4 est associée à des mécanismes sous-tendant la neuroinflammation et la douleur neuropathique, et elle a été étudiée en lien avec les réponses au stress vasculaire et métabolique. En tant que canal ionique membranaire répondant à l’ATP associé aux dommages, P2X4 constitue un nœud pertinent pour explorer la signalisation dépendante de l’ATP et les programmes transcriptionnels dépendants des flux ioniques.
P2X4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus P2RX4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de P2RX4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de P2RX4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de P2RX4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.