OTUD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432624
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- OTUD2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico OTUD2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
OTUD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432624 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Yod1 codifica a OTUD2, uma enzima desubiquitinante da família OTU que hidrolisa cadeias de ubiquitina para regular a estabilidade proteica e a amplitude de sinalização. A OTUD2 participa do controle dependente de ubiquitina da proteostase e de vias de sinalização responsivas ao estresse, incluindo circuitos inflamatórios e da imunidade inata, nos quais a ubiquitinação ajusta a ativação e a terminação das vias. Ao remodelar sinais de ubiquitina, a OTUD2 pode influenciar decisões de sobrevivência celular, respostas a danos no DNA e programas transcricionais ligados à homeostase celular. A desregulação da “edição” de ubiquitina tem sido implicada em diferentes contextos da biologia do câncer e em mecanismos de doenças imunomediadas, tornando Yod1/OTUD2 um nó útil para a dissecação de vias em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OTUD2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Yod1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Yod1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Yod1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OTUD2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Yod1 para a investigação da sinalização de OTUD2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Yod1 críticos para a função OTUD2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Yod1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo OTUD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo OTUD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Yod1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo OTUD2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR OTUD2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Yod1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Yod1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.